程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的的进展

反向肝细胞( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检骨骸”，已在移往性白血病、癌和结胃癌中都用做HRS赞誉。小肝细胞膀胱癌(Small celllung cancer，SCLC)许多组织骨骸来源极低，且缺乏有效的受控中都风移往和预见HRS的生物圣万。有数年来研究课题成果CTCs在SCLC中都的现代医学新技术的发展进行时了探寻性研究课题，见到CTCs对SCLC的病患、仍须，受控中都风、移往，分析报告、HRS以及建立联系表征疗法方案等较强举足轻重涵义，本文就CTCs在SCLC现代医学新技术的发展中都的研究课题进展予以综述。

一、SCLC病征CTCs的侦测方律

CTCs的侦测方律主要有流式肝细胞侦测新技术( fluocytometry，FCM)、逆转录病毒一聚合酶链反应会(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTCROM(CTC-chip)新技术和膜PSI分离肝细胞新技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中都CellSearch系统因其半自动化的系统设计平台，低的免疫、诱因和可重复性，成为最常新技术的发展的CTCs侦测方律。

早在2004年，Allard等率先新技术的发展CelISearch律侦测了99事例膀胱癌（未简述SCLC事例数）病征的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip律侦测了55事例膀胱癌病征上皮肝细胞尸C TCs。2009年以后的研究课题多采用CeIISearch律侦测SCI．C病征上皮肝细胞尸CTCs，然而该方律由于对缺乏上皮肝细胞构造的肝细胞会用到漏检不太可能，且与抗体磁珠及抗体结合的CTCs无律行某些后续的侦测，现代医学新技术的发展受到局限。

有数年来，随着基体科技的工业发展，特异性CTCs表面会圣万的免疫识别分f标记的基体材料结合微流控新技术的CTCs侦测平台的研究课题受到广泛重视，2013年，《人为》（Nature）杂志将CTCs基体侦测入选为最具新技术创新和转化商业价值的病患新新技术，成果一鸣惊人。但就目前来看，现有的CTCs侦测方律各有利弊，未有研究课题猜测哪种方律对SCLC的CTCs侦测更有优势。着眼期望，亟需共同开发免疫、诱因更高的CTCs侦测新技术，为SCLC的基础和现代医学研究课题带来突破。

二、CTCs在SCLC现代医学新技术的发展中都的研究课题现阶段

（一）CTCs小数与SCLC的病患、仍须

有数年来多项研究课题结果显示CTCs小数水准与SCLC的病患、仍须有长期以来0 2009年Tanaka等新技术的发展CeIISearch律侦测了1 50事例7.5ml上皮肝细胞尸CTCs，其中都膀胱癌1 25事例、非恶性25事例，膀胱癌病征包含116事例非小肝细胞膀胱癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9事例SCLC。

研究课题得出SCLC病征CTCs乙型肝炎率为66.70-/0（6事例／9事例），引人注意很低NSCLC病征的CTCs乙型肝炎率(卵巢癌25.9%，鳞癌40.9%；卵巢癌对比SCLC，P

同年，Hou等新技术的发展CeIISearch律侦测了50事例初治的SCLC病征上皮肝细胞尸CTCs，包含20事例局限期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病征和30事例广泛期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病征，孔径期ED-SCLC及LD-SCLC病征的中都位CTCs小数分作237和2个/7.5ml尸，7事例未检出CTCs的病征皆为LD-SCLC，证明CTCs小数水准与SCLC仍须多方面。

相似的结论在2012年被南韩人类学家Naito等猜测，研究课题成果在51事例SCLC病征中都立用CeIISearch律侦测孔径期CTCs水准，得出ED-SCLC,病征的中都位CTCs小数为9.5个f 7.5ml尸，而LD-SCLC仅为1个／7.51111尸，促使证明ED-SCLC病征的CTCs水准很低LD-SCLC病征。

（二）CTCs分析报告SCLC的及HRS

CTCs是否可作为分析报告SCLC和HRS的有救指f,箸研究课题成果们长期以来在概述的问题。Houi等在2009年通过CellSearch律侦测了50事例SCLC病征(LD-SCLC20事例，ED-SCLC30事例)的CTCs，见到CTCs>300个/7.5ml尸的病征及CTCs

孔径期CTCs>=50和

在该研究课题中都SCLC病征的HRS下定义差值设定8个/7.5ml尸，以此将病征包含CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样新技术的发展CellSearch律侦测59事例SCLC病征在孔径期、1间隔低剂量后及4间隔低剂量终结后外固尸CTCs水准，其中都ED-SCLC病征38事例，LD-SCLC病征2 1事例c孔径期有43事例病征(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml尸，CTCs>215个/7.5ml尸和CTCs

经过1间隔低剂量后病征CTCs水准引人注意降低，且1间隔低剂量后CTCs

研究课题成果推断CTCs水准是SCLCHRS的单一影响突变，其中都1间隔低剂量后CTCs水准是SCLC和HRS最强的预见突变。

2013年ASCO发表的ECOG1508研究课题中都，研究课题成果想律在155事例ED-SCLC中都加入特异性疗法，并对其中都123事例病征孔径期CTCs进行时侦测，得出特异性疗法未有延长ED-SCLC病征的PFS和OS，但见到孔径期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml尸的mPFS分作4.4和4.3个月（P=0.07），OS分作10.7和7.2个月(P=0.01)。研究课题成果认为虽然特异性疗法没能提升ED-SCLC病征的PFS和OS，但却见到了CTCs不太可能是SCLC病征的HRS圣万。

差值得注意，Igawa等想律新技术的发展OBP-401次测试侦测SCLC病征上皮肝细胞尸CTCso新技术的发展OBP-401次测试侦测白血病和胃癌病征CTCs的多方面研究课题已有前期报道。研究课题纳入30事例韧治的SCLC病征，29事例病征(96%)上皮肝细胞尸CTCs乙型肝炎。在孔径期，21事例病征CTCs

（三）CTCs受控SCLC的中都风和移往

现有的研究课题表明通过侦测CTCs的用到来受控SCLC的中都风和移往较强举足轻重的现代医学涵义o Tanaka等研究课题见到CTCs水准‘j 125事例膀胱癌病征（包含9事例SCLC病征）进展引人注意多方面，特别是与恰好移往密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据资料，写作者认为CTCs可作为受控膀胱癌恰好移往的生物标记物。Natio等研究课题见到SCLC在孔径期、疗法终结后及中都风后CTCs的乙型肝炎率分作68.6%、26.5%和67.6，指引SCLC中都风后上皮肝细胞学CTCs水准增高，发生恰好移往脊柱的数目为0、1和>=2的病征其中都位CTCs小数分作2.0、7.5和21个/7.5ml尸,指引CTCs水准与恰好移往脊柱的数目有关，恰好移往越多，CTCs小数越高（p

三、CTCs在SCLC现代医学新技术的发展中都的探寻方向

中都风和移往是所致病征疗法收场和失踪的主要因素，第一间隔时间见到的中都风和移往并采敢积极有效的疗法措施可显著提升病征致死率。然而，由于SCLC缺乏能够受控中都风和移往的生物圣万，且常规影像学安全检查无律见到微移往灶及微小存留病灶，所致发生中都风和移往的SCLC病征不可第一间隔时间做病患和疗法。

现代医学中都部分LD-SCLC的病征HRS差异较大，指引有些局限期的病征在病患时不太可能已发生了影像学不可见到的微移往而成为潜在的广泛期病征。通过侦测上皮肝细胞尸CTCs的用到及数目波动从而对SCLC病征体内静止状态进行时实时、实时地受控和赞誉，第一间隔时间见到的中都风、移往，将有助于现代医学药剂师对疗法时机的把握和疗法手段的选取，但究竟CTCs的数目或波动差值为多少时能够正确反映SCLC的中都风或移往尚不明确，需要更多的循证现代医学证据予以全力支持。

CTCs在分析报告SCLC病征疗法多方面的新技术的发展尚保持稳定探寻阶段，疗法过程中都CTCs数目的波动与SCLC病征低剂量的关联性及其与SCLC病征放疗时机的选取等问题在期望需大量的现代医学研究课题。有数5年，对CTCs是否可作为SCLC病征HRS这两项的研究课题慢慢增多，但SCLC最佳的HRSCTCs下定义差值尚无断定，质疑颇多。

其中都3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究课题将SCLC的HRSCTCs畀定差值分别设定为50、8和2个／7.5ml尸，差异很大，这不太可能与研究课题采用的统计学方律不尽相同以及入组样本量较少有关。早先意大利人类学家Normanno等论点将ED-SCLC和LD-SCLC病征分开研究课题，对孔径期、l间隔低剂量后CTCs以及疗法前后CTCs的波动差值分别设定HRS下定义差值，为期望的研究课题获取了原先思路。因由所在的科研团队也正致力于必将SCLC病征HRS最佳CTCs下定义差值的研究课题，结果令人欣慰。

的表征疗法是疗法模式的工业发展方向。SCLC病征对低剂量抑制剂的反应会存在引人注意的个体差异，其主要因素不太可能与复杂的异质性、调控差异及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的分子生物学构造对实现真正涵义上的SCLC表征疗法尤为举足轻重。早先必将人类学家王洁等研究课题人员通过新技术的发展单肝细胞基因化学合成手段对病征单个CTC进行时全线粒体、线粒体线粒体化学合成。

在此项研究课题中都，谢晓亮研究员发明的多重退火和加成反向的导入新技术(MAIBAC)，成功实现了对病征上皮肝细胞尸单个CTC的全线粒体导入和深度化学合成，在单个肝细胞水准探测全线粒体基因拷贝数相异(CNVs)和单核苷酸相异(SNVs)o单肝细胞水准CTCs线粒体化学合成新技术可第一间隔时间获取如脑膜炎基因突变等表征疗法所需的举足轻重个人信息，同时也为期望SCLC特异性抑制剂的共同开发获取新技术全力支持。

SCLC许多组织骨骸很难赚取，限制了后续各项安全检查和研究课题的卓有成效，而利用CTCs构筑的SCLC反向肝细胞移植糙( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望妥善解决这一复杂化难题。差值得注意，Hodgkinson等想律将6事例ED-SCLC病征lOml上皮肝细胞尸中都的CTCs萃取后注射到抗体缺陷激素腹膜，结果在4只激素身上演化成了CDXs，证明SCLC病征的CTCs较强致糙性。

同时新技术的发展CelISearch律侦测这6事例SCLC病征的CTCs，得出成功演化成CDXs的4事例病征的CTCs小数皆>400个／7.5ml尸，而另外2事例未演化成CDXs的病征其CTCs小数分作222和20个／7.5ml尸，指引SCLC的CTCs致糙性与上皮肝细胞尸CTCs教量有关。促使分析见到相较于低剂量诱因SCLC，低剂量脑膜炎性SCLC病征的CDXs倍增间隔时间粗壮、生长更迅速。对3事例CDXs给予顺铂和遥相呼应泊苷低剂量抑制剂，其诱因顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病征的OS分作9.7.3.5.0.9个月，指引对CDXs进行时体内药敏次测试可以间接反应会病征生存间隔时间。

该研究课题结果显示部分SCLC的上皮肝细胞尸CTCs较强干肝细胞特性，可进行时体内人才培养、演化成与原发相对相似的CDXs，为SCLC病征的体内药敏次测试、脑膜炎机制分析等一系列安全检查和研究课题获取了足量的许多组织，妥善解决了SCLC病征骨骸来源极低的问题。

结论

从现行的研究课题可以看出，虽然CTCs在SCLC中都的现代医学新技术的发展仍保持稳定探寻阶段，但前景广阔。目前，诸多转化性研究课题正在进行时中都，确信随着研究课题的不断深入，CTCs有望成为SCLC的突破口，欣慰CTCs在SCLC的科技领域中都为我们带来惊喜。

编辑： 喜